作者bloodsuckant (吸血鬼螞蟻)
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標題[求救] 加入FBS的medium用.45過濾
時間Sat Aug 13 11:43:39 2011
之前配細胞用的medium時 我們都先把DMEM+PS用.22過濾以後 再加入血清
我有牢牢記住前輩跟我說的 FBS會卡在濾網上過不去喔！ 啾咪～
這陣子要用的293FT的cell line
在看使用手冊的時候發現
他叫我把所有的東西都放進medium以後（包含10% FBS）
用.45的filter過濾
這...我應該照做嗎？
還是我跟之前一樣，把其他的東西加一家加濾以後
血清最後再加呢？？？
我實在不想浪費貴鬆鬆的材料阿...而且
medium一失敗 我所有的東西就都要重買了 包刮cell line呢...
請大家給我建議 我已經爬過文了
有看到之前某大大用.22過濾結果一直被卡住的例子
難道.45就可以順利的過去？？？
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 211.86.156.114
1F：→ roy047:.45>.22 就這樣...... 08/13 11:55
2F：→ bloodsuckant:那個...我知道 可是我想知道他到底夠不夠大... 08/13 12:03
3F：推 leoblack:.45過了並非無菌~只能算過雜質罷了 08/13 12:28
4F：推 machin:推樓上~.45不能保證無菌!何且為啥一定要加血清一併過濾呢? 08/13 13:07
5F：→ machin:血清如果怕有雜質 可以用離心先離掉~ 08/13 13:09
6F：→ bloodsuckant:所以就不論他的手冊怎麼寫 我最後再加摟？ 08/13 13:36
7F：推 shenhsu:3,4樓大大 .45真的無法無菌?! 實驗室不能滅的都只過.45耶 08/13 14:52
8F：推 conective:一般要無菌都是過.22吧 08/13 15:10
9F：→ conective:.22是比較保險 .45沒實驗過 但是一般來說.22比較貴 08/13 15:11
10F：推 aggaci:我們lab都加了FBS過.22的filter OK的! 08/13 16:01
11F：推 machin:樓上要看用哪個牌子的filter,有些聽說容易塞~Orz 08/13 16:02
12F：推 aggaci:歐歐~的確 我們都用millipore的 一次過5L 不太塞 08/13 17:25
13F：推 icome:沒有必要 而且一般的FBS都已經過濾過了 都是無菌的 08/13 18:49
14F：→ gryou:現在很多買來的FBS都是已經去補體＋無菌的可以直接用了！ 08/13 20:36
15F：→ gryou:如果怕的話 millipore 還不錯用 costar則是很容易塞住 08/13 20:38
16F：推 Realthugz:.45應該只是要去雜質而已 就像收virus或CM時 08/13 22:34
17F：推 leoblack:做cell culture的煩請過.22才能算無菌(但去不了黴漿菌) 08/13 22:36
18F：→ leoblack:不然就是autoclave,只過.45的只能算去雜質~ 08/13 22:37
19F：推 yaliu:FBS買來就是無菌的阿，除非解凍過程中產生蛋白質凝結，然後 08/15 12:30
20F：→ yaliu:你看它很礙眼，那就加入medium過 .22 08/15 12:30
21F：推 mournermind:應該只是為了過FBS中的雜質 我看過有人這樣過 但是若 08/17 00:37
22F：→ mournermind:要無菌 45不保險喔 不如FBS不要過 因為他過只是為了 08/17 00:37
23F：→ mournermind:去沉澱雜質 08/17 00:37
24F：→ sdgaejr118:其實你可以看你們買的FBS上面是否有註明說已經過濾滅 08/23 01:23
25F：→ sdgaejr118:菌 如果他有一個像沙漏的圖示就代表已有過濾滅菌 08/23 01:24
26F：→ sdgaejr118:那就算你不過濾 直接加也可以啦 08/23 01:25
27F：→ sdgaejr118:如果本身沒有過濾滅菌 那你就過.22的 我過是沒塞住過 08/23 01:26
28F：推 lucidol:我FBS都直接分裝加入culture中,過濾會把裡面一些東西率掉 08/24 10:31
29F：推 greendeer: 其實大部分的細菌，size都大於0.5um,因此才會有用0.45 09/07 18:49
30F：→ greendeer:過濾的做法出現。黴漿菌大概是大腸桿菌的十分之一大小。 09/07 18:52
31F：→ greendeer:但以我自己的經驗，點22或點45都會長mold 09/07 18:53