作者bloodsuckant (吸血鬼蚂蚁)
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标题[求救] 加入FBS的medium用.45过滤
时间Sat Aug 13 11:43:39 2011
之前配细胞用的medium时 我们都先把DMEM+PS用.22过滤以後 再加入血清
我有牢牢记住前辈跟我说的 FBS会卡在滤网上过不去喔！ 啾咪～
这阵子要用的293FT的cell line
在看使用手册的时候发现
他叫我把所有的东西都放进medium以後（包含10% FBS）
用.45的filter过滤
这...我应该照做吗？
还是我跟之前一样，把其他的东西加一家加滤以後
血清最後再加呢？？？
我实在不想浪费贵松松的材料阿...而且
medium一失败 我所有的东西就都要重买了 包刮cell line呢...
请大家给我建议 我已经爬过文了
有看到之前某大大用.22过滤结果一直被卡住的例子
难道.45就可以顺利的过去？？？
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 211.86.156.114
1F：→ roy047:.45>.22 就这样...... 08/13 11:55
2F：→ bloodsuckant:那个...我知道 可是我想知道他到底够不够大... 08/13 12:03
3F：推 leoblack:.45过了并非无菌~只能算过杂质罢了 08/13 12:28
4F：推 machin:推楼上~.45不能保证无菌!何且为啥一定要加血清一并过滤呢? 08/13 13:07
5F：→ machin:血清如果怕有杂质 可以用离心先离掉~ 08/13 13:09
6F：→ bloodsuckant:所以就不论他的手册怎麽写 我最後再加搂？ 08/13 13:36
7F：推 shenhsu:3,4楼大大 .45真的无法无菌?! 实验室不能灭的都只过.45耶 08/13 14:52
8F：推 conective:一般要无菌都是过.22吧 08/13 15:10
9F：→ conective:.22是比较保险 .45没实验过 但是一般来说.22比较贵 08/13 15:11
10F：推 aggaci:我们lab都加了FBS过.22的filter OK的! 08/13 16:01
11F：推 machin:楼上要看用哪个牌子的filter,有些听说容易塞~Orz 08/13 16:02
12F：推 aggaci:欧欧~的确 我们都用millipore的 一次过5L 不太塞 08/13 17:25
13F：推 icome:没有必要 而且一般的FBS都已经过滤过了 都是无菌的 08/13 18:49
14F：→ gryou:现在很多买来的FBS都是已经去补体＋无菌的可以直接用了！ 08/13 20:36
15F：→ gryou:如果怕的话 millipore 还不错用 costar则是很容易塞住 08/13 20:38
16F：推 Realthugz:.45应该只是要去杂质而已 就像收virus或CM时 08/13 22:34
17F：推 leoblack:做cell culture的烦请过.22才能算无菌(但去不了霉浆菌) 08/13 22:36
18F：→ leoblack:不然就是autoclave,只过.45的只能算去杂质~ 08/13 22:37
19F：推 yaliu:FBS买来就是无菌的阿，除非解冻过程中产生蛋白质凝结，然後 08/15 12:30
20F：→ yaliu:你看它很碍眼，那就加入medium过 .22 08/15 12:30
21F：推 mournermind:应该只是为了过FBS中的杂质 我看过有人这样过 但是若 08/17 00:37
22F：→ mournermind:要无菌 45不保险喔 不如FBS不要过 因为他过只是为了 08/17 00:37
23F：→ mournermind:去沉淀杂质 08/17 00:37
24F：→ sdgaejr118:其实你可以看你们买的FBS上面是否有注明说已经过滤灭 08/23 01:23
25F：→ sdgaejr118:菌 如果他有一个像沙漏的图示就代表已有过滤灭菌 08/23 01:24
26F：→ sdgaejr118:那就算你不过滤 直接加也可以啦 08/23 01:25
27F：→ sdgaejr118:如果本身没有过滤灭菌 那你就过.22的 我过是没塞住过 08/23 01:26
28F：推 lucidol:我FBS都直接分装加入culture中,过滤会把里面一些东西率掉 08/24 10:31
29F：推 greendeer: 其实大部分的细菌，size都大於0.5um,因此才会有用0.45 09/07 18:49
30F：→ greendeer:过滤的做法出现。霉浆菌大概是大肠杆菌的十分之一大小。 09/07 18:52
31F：→ greendeer:但以我自己的经验，点22或点45都会长mold 09/07 18:53