作者pipizone (pipizone)
看板Biotech
標題[求救]SKOV3 plating時出現的問題
時間Thu Aug 4 11:49:06 2011
問題大致上是這樣的
我們將SKOV3 cell種在三個T75 flask進行plating
0.05% trypsin作用後都有切下來(有再用顯微鏡看flask狀況)
結果離心之後用5%FBS回溶細胞開始數細胞
卻發現細胞數遠低於估計的量
當下想不出問題在哪 所以那時候猜測可能是高估T75 flask的細胞量
(我們估SKOV3在T75長滿有5 million細胞數)
所以就將細胞種回五個T75 flask 可是在種回去細胞 以及貼一天之後的細胞量
怎麼看都感覺就是三個flask分成五個flask的量
所以後來感覺就是計數細胞發生的問題
後來想到我們實驗室數SKOV3都不用trypan blue
這樣子有可能高估 可是我現在的狀況是低估
請問大家這可能是甚麼問題呢?謝謝~
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 120.126.51.150
1F：→ gryou:計數細胞有沒有發生aggregation現象？ 08/04 13:37
2F：→ pipizone:很少ㄟ 頂多兩個在一起 要不然都挺平均散步的 08/04 15:52
3F：→ pipizone:我們有注意有沒有打散 後來plating看起來也都有打散 08/04 15:52