作者pipizone (pipizone)
看板Biotech
标题[求救]SKOV3 plating时出现的问题
时间Thu Aug 4 11:49:06 2011
问题大致上是这样的
我们将SKOV3 cell种在三个T75 flask进行plating
0.05% trypsin作用後都有切下来(有再用显微镜看flask状况)
结果离心之後用5%FBS回溶细胞开始数细胞
却发现细胞数远低於估计的量
当下想不出问题在哪 所以那时候猜测可能是高估T75 flask的细胞量
(我们估SKOV3在T75长满有5 million细胞数)
所以就将细胞种回五个T75 flask 可是在种回去细胞 以及贴一天之後的细胞量
怎麽看都感觉就是三个flask分成五个flask的量
所以後来感觉就是计数细胞发生的问题
後来想到我们实验室数SKOV3都不用trypan blue
这样子有可能高估 可是我现在的状况是低估
请问大家这可能是甚麽问题呢?谢谢~
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 120.126.51.150
1F:→ gryou:计数细胞有没有发生aggregation现象? 08/04 13:37
2F:→ pipizone:很少ㄟ 顶多两个在一起 要不然都挺平均散步的 08/04 15:52
3F:→ pipizone:我们有注意有没有打散 後来plating看起来也都有打散 08/04 15:52