作者lblackpig (小黑豬)
看板Biotech
標題[求救]細胞染色時細胞容易脫落
時間Mon Aug 1 11:42:15 2011
我使用的細胞是平滑肌細胞，將細胞處理過後使之貼附於fubronectin上約兩小時。
PBS was後以formalin固定，再以PBS wash兩次後以0.1% triton x-100打洞，再以PBS
wash兩次，之後以phalloidin染色一個小時，再以PBS wash三次。我的細胞是種在
24-well。結果細胞掉落的相當嚴重。我確定我在清洗的時候相當小心。
請教有沒有好方法（或小技巧）可以改善細胞脫落的情形。謝謝！
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◆ From: 140.116.61.31
1F：→ gryou:fibronectin.... 08/01 12:45
2F：→ gryou:原來真的有fubronectin 抱歉XD fix與打洞時間減少試試看！ 08/01 12:47
3F：推 leoblack:coating poly-lysine有幫助嘛!? 08/01 13:42
4F：推 btsd:PBS加Ca有幫助嗎? 08/01 15:31
5F：→ lblackpig:已經coat fibronetin，在加上poly-L-lysine有點怪..... 08/01 16:13
6F：→ lblackpig:請問有人試過PBS+Ca+Mg在細胞染色可防止細胞掉落嗎？ 08/01 16:15
7F：推 gryou:PBS+ 1mM CaCl2 + 0.5mM MgCl2 pH=7.2 試試看吧！ 08/01 16:38
8F：→ gryou:Ca2+ 與 MgCl2+ 似乎可以增加 cell adhesion 08/01 16:39
9F：→ gryou: 多打了Cl 08/01 16:39
10F：→ lblackpig:謝謝，使用PBS + Ca + Mg真的有比較好。 08/04 15:57