作者lblackpig (小黑猪)
看板Biotech
标题[求救]细胞染色时细胞容易脱落
时间Mon Aug 1 11:42:15 2011
我使用的细胞是平滑肌细胞，将细胞处理过後使之贴附於fubronectin上约两小时。
PBS was後以formalin固定，再以PBS wash两次後以0.1% triton x-100打洞，再以PBS
wash两次，之後以phalloidin染色一个小时，再以PBS wash三次。我的细胞是种在
24-well。结果细胞掉落的相当严重。我确定我在清洗的时候相当小心。
请教有没有好方法（或小技巧）可以改善细胞脱落的情形。谢谢！
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◆ From: 140.116.61.31
1F：→ gryou:fibronectin.... 08/01 12:45
2F：→ gryou:原来真的有fubronectin 抱歉XD fix与打洞时间减少试试看！ 08/01 12:47
3F：推 leoblack:coating poly-lysine有帮助嘛!? 08/01 13:42
4F：推 btsd:PBS加Ca有帮助吗? 08/01 15:31
5F：→ lblackpig:已经coat fibronetin，在加上poly-L-lysine有点怪..... 08/01 16:13
6F：→ lblackpig:请问有人试过PBS+Ca+Mg在细胞染色可防止细胞掉落吗？ 08/01 16:15
7F：推 gryou:PBS+ 1mM CaCl2 + 0.5mM MgCl2 pH=7.2 试试看吧！ 08/01 16:38
8F：→ gryou:Ca2+ 与 MgCl2+ 似乎可以增加 cell adhesion 08/01 16:39
9F：→ gryou: 多打了Cl 08/01 16:39
10F：→ lblackpig:谢谢，使用PBS + Ca + Mg真的有比较好。 08/04 15:57