作者poulnew (poulnew)
看板Biotech
標題[求救] Cell transfection efficiency
時間Mon Jul 25 23:03:06 2011
我們家最近在做transfection
主要是用電穿孔法和 Fugene(liposome)在傳
可惜效果一直沒有很好
目前跟老師討論出來的可能的原因如下
希望各位先進能夠指正 感恩
1.由於我們家是必須一次要傳入4個gene到cell內
別人的paper是將這4個gene insert到同一個vector內
而我們則是分別insert到4個pcDNA3.1中
而因為有4種plasmid所以在transfection時
必須要將能夠傳的最大量的plasmid均分為四
因而降低efficiency
2.pcDNA3.1上的promoter為CMV 根據別人的文獻指出
他們特地將CMV換成 pCX 上的CAG promoter
想請問有人知道 CAG真的有比CMV更強或是好嗎?
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 114.41.138.211
1F：推 rebirth:2. 看cell line 不過普遍來說 CAG比CMV強 07/26 01:02
2F：推 johanjohan:如果要作IPS 建議4個基因在同一vector 07/26 13:16
3F：→ celestial318:四種一起送或分開送好像有差 07/26 13:16
4F：→ poulnew:樓上是馬老師家的學長嗎? XD 07/26 14:12