作者poulnew (poulnew)
看板Biotech
标题[求救] Cell transfection efficiency
时间Mon Jul 25 23:03:06 2011
我们家最近在做transfection
主要是用电穿孔法和 Fugene(liposome)在传
可惜效果一直没有很好
目前跟老师讨论出来的可能的原因如下
希望各位先进能够指正 感恩
1.由於我们家是必须一次要传入4个gene到cell内
别人的paper是将这4个gene insert到同一个vector内
而我们则是分别insert到4个pcDNA3.1中
而因为有4种plasmid所以在transfection时
必须要将能够传的最大量的plasmid均分为四
因而降低efficiency
2.pcDNA3.1上的promoter为CMV 根据别人的文献指出
他们特地将CMV换成 pCX 上的CAG promoter
想请问有人知道 CAG真的有比CMV更强或是好吗?
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 114.41.138.211
1F：推 rebirth:2. 看cell line 不过普遍来说 CAG比CMV强 07/26 01:02
2F：推 johanjohan:如果要作IPS 建议4个基因在同一vector 07/26 13:16
3F：→ celestial318:四种一起送或分开送好像有差 07/26 13:16
4F：→ poulnew:楼上是马老师家的学长吗? XD 07/26 14:12