作者alicialai (Fairy Monster)
看板Biotech
標題Re: [討論] FA跟PFA的差異
時間Tue Jul 12 06:57:32 2011
※ 引述《leoblack (朋友看太重的猫)》之銘言：
: 如題
: 抱歉標題有字數限制~所以才打縮寫
: 我所謂的FA=formaldehyde, PFA=paraformaldehyde
: 雖然聽學長姐們說~immunostaining時的fix用FA跟PFA都可以
: 而各種不同的protocol比較起來
: 雖然有的是用FA,有的是用PFA,做起來效果也大同小異
: 但我發現~似乎PFA所需要的濃度總是比FA來的低
: 是因為FA效果比PFA來得差~所以要濃一點fix效果才會跟PFA一樣好嘛!?
: 感謝
PFA是polymerised的FA, 其實FA在室溫放久了也會polymerised to PFA,
100%的FA是gas form, 所以市售的liquid FA都是35~40%, 也就是所謂的formalin,
這兩者用在fixation的conc. 其實差不多, between 3.5% to 4%
如果說真的會有影響,
就是FA通常ph偏酸(commercial liquid product),
而且會含有一定量的methanol(3%~8%),
如果你的antigen會被methanol破壞, 或許PFA是較好的選擇,
PFA有powder form product, 但是配法真的是很不親切,
(unless EM sample, 但是EM用的PFA比較貴, 用在一般的IF倒是沒必要~)
我的經驗是用3.5% PFA or 4% FA的效果對我來說都差不多,(for IF)
現在用的是FA, 原因其實很簡單~~
1. PFA和FA做出來的實驗結果差不多
2. PFA太難配又臭, 在這個過份注重OHS的地方, 我不想造成issue,
3. FA比較好配, 我只要用PBS做10X dilution就可以
希望有幫到您的忙, 文法上有錯還請見諒..
(我這次盡量用中文了........lol)
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◆ From: 116.240.163.1
1F：推 goshr:印象中是3.8%和4%, 差別是w/v 和v/v單位的不同 07/12 13:59
2F：→ goshr:以上是指formadehyde 07/12 14:00
3F：推 sweetE:強者!!!!!!!!!!! 07/27 16:54