作者alicialai (Fairy Monster)
看板Biotech
标题Re: [讨论] FA跟PFA的差异
时间Tue Jul 12 06:57:32 2011
※ 引述《leoblack (朋友看太重的猫)》之铭言：
: 如题
: 抱歉标题有字数限制~所以才打缩写
: 我所谓的FA=formaldehyde, PFA=paraformaldehyde
: 虽然听学长姐们说~immunostaining时的fix用FA跟PFA都可以
: 而各种不同的protocol比较起来
: 虽然有的是用FA,有的是用PFA,做起来效果也大同小异
: 但我发现~似乎PFA所需要的浓度总是比FA来的低
: 是因为FA效果比PFA来得差~所以要浓一点fix效果才会跟PFA一样好嘛!?
: 感谢
PFA是polymerised的FA, 其实FA在室温放久了也会polymerised to PFA,
100%的FA是gas form, 所以市售的liquid FA都是35~40%, 也就是所谓的formalin,
这两者用在fixation的conc. 其实差不多, between 3.5% to 4%
如果说真的会有影响,
就是FA通常ph偏酸(commercial liquid product),
而且会含有一定量的methanol(3%~8%),
如果你的antigen会被methanol破坏, 或许PFA是较好的选择,
PFA有powder form product, 但是配法真的是很不亲切,
(unless EM sample, 但是EM用的PFA比较贵, 用在一般的IF倒是没必要~)
我的经验是用3.5% PFA or 4% FA的效果对我来说都差不多,(for IF)
现在用的是FA, 原因其实很简单~~
1. PFA和FA做出来的实验结果差不多
2. PFA太难配又臭, 在这个过份注重OHS的地方, 我不想造成issue,
3. FA比较好配, 我只要用PBS做10X dilution就可以
希望有帮到您的忙, 文法上有错还请见谅..
(我这次尽量用中文了........lol)
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 116.240.163.1
1F：推 goshr:印象中是3.8%和4%, 差别是w/v 和v/v单位的不同 07/12 13:59
2F：→ goshr:以上是指formadehyde 07/12 14:00
3F：推 sweetE:强者!!!!!!!!!!! 07/27 16:54