作者borhen (希望夢想成真)
看板Biotech
標題[求救] Western Blot的問題
時間Sun Jul 3 01:08:32 2011
我使用的流程
是利用濕式轉置槽的 40 mA 16 hrs
所使用的membrane為 0.22 um PVDF
_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 夾板 (-)
____________________________ 3M 紙*2
____________________________ 膠
============================ PVDF
____________________________ 3M 紙*2
_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 夾板 (+)
經過blocking 一抗 二抗 到冷光壓片
發現到一個問題
就是壓片結果的圖 有嚴重黑色的框線 (很像是轉置槽的夾板)
http://www.badongo.com/pic/13288630
這樣的狀況做實驗時有時無 .... 請問原因是因為轉置時間過久的關係嗎
還是有其他原因? 是否有方法可以解決 請教各位版友了。。。 謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.113.55.240
1F：→ biingru:你加入呈色劑之後，反應一下，壓片前，要把多餘的試劑吸走 07/03 01:34
2F：推 spirithorse:我以前遇過這問題,無解耶..似乎不是ECL的問題 07/03 11:29
3F：→ spirithorse:後來發現transfer機器的白金線有很多結晶,清掉就痊癒! 07/03 11:30
4F：→ drosophila:那是一般的wb? 比起外框..裡面的東西好像更值得改進 07/03 12:16
5F：→ borhen:To Biingru 我有把試劑吸掉 07/03 21:41
6F：→ borhen:To spirithorse 我試試看!!謝謝 07/03 21:42
※ 編輯: borhen 來自: 140.113.55.240 (07/03 21:44)
7F：→ borhen:謝謝各位板友的意見 07/03 21:44
8F：→ hek:Transfer機器沒洗乾淨, 把泡棉/夾板/tank全部刷一次. 07/04 02:22
9F：→ lail:你有用"菜瓜布"嗎?如果有的話可能是"菜瓜布"沒有完全浸透 07/06 01:13