作者borhen (希望梦想成真)
看板Biotech
标题[求救] Western Blot的问题
时间Sun Jul 3 01:08:32 2011
我使用的流程
是利用湿式转置槽的 40 mA 16 hrs
所使用的membrane为 0.22 um PVDF
_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 夹板 (-)
____________________________ 3M 纸*2
____________________________ 胶
============================ PVDF
____________________________ 3M 纸*2
_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 夹板 (+)
经过blocking 一抗 二抗 到冷光压片
发现到一个问题
就是压片结果的图 有严重黑色的框线 (很像是转置槽的夹板)
http://www.badongo.com/pic/13288630
这样的状况做实验时有时无 .... 请问原因是因为转置时间过久的关系吗
还是有其他原因? 是否有方法可以解决 请教各位版友了。。。 谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.113.55.240
1F：→ biingru:你加入呈色剂之後，反应一下，压片前，要把多余的试剂吸走 07/03 01:34
2F：推 spirithorse:我以前遇过这问题,无解耶..似乎不是ECL的问题 07/03 11:29
3F：→ spirithorse:後来发现transfer机器的白金线有很多结晶,清掉就痊癒! 07/03 11:30
4F：→ drosophila:那是一般的wb? 比起外框..里面的东西好像更值得改进 07/03 12:16
5F：→ borhen:To Biingru 我有把试剂吸掉 07/03 21:41
6F：→ borhen:To spirithorse 我试试看!!谢谢 07/03 21:42
※ 编辑: borhen 来自: 140.113.55.240 (07/03 21:44)
7F：→ borhen:谢谢各位板友的意见 07/03 21:44
8F：→ hek:Transfer机器没洗乾净, 把泡棉/夹板/tank全部刷一次. 07/04 02:22
9F：→ lail:你有用"菜瓜布"吗?如果有的话可能是"菜瓜布"没有完全浸透 07/06 01:13