作者tenhiko (tenhiko)
看板Biotech
標題[求救] PCR跑出來的BAND不好看
時間Tue Jun 28 02:55:03 2011
小弟剛開始跑PCR，跑出來的BAND老是這個樣子
請問各位這是出了甚麼問題呢
附上圖片
http://ppt.cc/at~x
http://ppt.cc/KeIE
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◆ From: 61.62.151.32
※ 編輯: tenhiko 來自: 61.62.151.32 (06/28 02:58)
1F：→ GauYi:看起來是你膠沒有泡好 不然就是電極走位了 06/28 09:01
2F：→ g010377:之前我忘記用TAE去製膠 用ddwater製膠跑出來也是這樣... 06/28 10:11
3F：推 cocodo:你的primer感覺不太好 應該加個internal control試試才知 06/28 10:40
4F：→ cocodo:PCR有沒有問題 或是你的template有沒有問題...之類的 06/28 10:41
5F：→ cocodo:要control，不然很難知道問題底。 06/28 10:42
6F：→ untilnow:像在打小蜜蜂... 06/28 10:51
7F：→ shenhsu:膠應該沒問題marker滿清楚的 應該是PCR sample或dye的問題 06/28 12:31
8F：→ kingtiger:sample沒有分布到整個well中,dye可加多或換dye試試看 06/28 13:03
9F：→ kingtiger:鑄膠的時候不要太快拔comb,拔的時候也小心拔 06/28 13:04
10F：→ spirithorse:做膠的時後,讓膠慢慢冷卻(有一次我放冰箱就會這樣) 06/28 13:57
11F：→ spirithorse:或是TAE用太多次,發熱,讓膠有點溶 06/28 13:57
12F：推 boyo:No 是 overloading 06/28 21:47
13F：推 Ianthegood:推overload一個 06/28 22:15
14F：→ elderbear:我覺得不是overloading,相對不亮的band也是同樣pattern 06/28 22:54
15F：→ gryou:甘油太多！ 06/29 02:04
16F：→ vita895:marker糊的! 膠有問題吧? 看是不是配錯濃度? 06/30 09:47
17F：→ drosophila:膠沒做好 MARKER雖然有出來 但是是糊的 07/03 12:19
18F：推 caf75722:我也覺得是overload 07/06 16:27
19F：→ zamki:膠要慢冷卻, 有primer dimer, primer品質不好, 07/13 18:50
20F：→ zamki:還有看起來歪歪的, 不是膠沒均勻就是電極有問題 07/13 18:51