作者tenhiko (tenhiko)
看板Biotech
标题[求救] PCR跑出来的BAND不好看
时间Tue Jun 28 02:55:03 2011
小弟刚开始跑PCR，跑出来的BAND老是这个样子
请问各位这是出了甚麽问题呢
附上图片
http://ppt.cc/at~x
http://ppt.cc/KeIE
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 61.62.151.32
※ 编辑: tenhiko 来自: 61.62.151.32 (06/28 02:58)
1F：→ GauYi:看起来是你胶没有泡好 不然就是电极走位了 06/28 09:01
2F：→ g010377:之前我忘记用TAE去制胶 用ddwater制胶跑出来也是这样... 06/28 10:11
3F：推 cocodo:你的primer感觉不太好 应该加个internal control试试才知 06/28 10:40
4F：→ cocodo:PCR有没有问题 或是你的template有没有问题...之类的 06/28 10:41
5F：→ cocodo:要control，不然很难知道问题底。 06/28 10:42
6F：→ untilnow:像在打小蜜蜂... 06/28 10:51
7F：→ shenhsu:胶应该没问题marker满清楚的 应该是PCR sample或dye的问题 06/28 12:31
8F：→ kingtiger:sample没有分布到整个well中,dye可加多或换dye试试看 06/28 13:03
9F：→ kingtiger:铸胶的时候不要太快拔comb,拔的时候也小心拔 06/28 13:04
10F：→ spirithorse:做胶的时後,让胶慢慢冷却(有一次我放冰箱就会这样) 06/28 13:57
11F：→ spirithorse:或是TAE用太多次,发热,让胶有点溶 06/28 13:57
12F：推 boyo:No 是 overloading 06/28 21:47
13F：推 Ianthegood:推overload一个 06/28 22:15
14F：→ elderbear:我觉得不是overloading,相对不亮的band也是同样pattern 06/28 22:54
15F：→ gryou:甘油太多！ 06/29 02:04
16F：→ vita895:marker糊的! 胶有问题吧? 看是不是配错浓度? 06/30 09:47
17F：→ drosophila:胶没做好 MARKER虽然有出来 但是是糊的 07/03 12:19
18F：推 caf75722:我也觉得是overload 07/06 16:27
19F：→ zamki:胶要慢冷却, 有primer dimer, primer品质不好, 07/13 18:50
20F：→ zamki:还有看起来歪歪的, 不是胶没均匀就是电极有问题 07/13 18:51