作者kvw (Je t'aime)
看板Biotech
標題[求救] SDS PAGE跑膠 marker會糊掉
時間Tue Jun 14 21:37:43 2011
最近跑SDS PAGE時
marker都會糊掉
從stacking下來時會分的很漂亮
但越跑越下面
72kDa以上的marker就會漸漸糊掉
而72以下的marker也會有smear的現象
勉強壓完片 high MW的protein都有smear的情形
我用的是12%的膠
上層用80V 下層用100V
之前都沒啥問題
但現在卻老是出問題
不知道有人遇到過同樣的問題嗎
希望有高手能伸出援手 拜託了~
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 58.115.130.41
1F：→ vita895:smear? 06/14 23:59
2F：→ vita895:可能有很多原因，最有可能是漏膠(膠體結構跑掉了)，還是.. 06/15 00:00
3F：→ vita895:running buffer濃度有誤? 甚至maker變質? 06/15 00:09
4F：→ vita895:"stacking下來時會分的很漂亮"也不是SDS-PAGE成功與否的 06/15 00:10
5F：→ vita895:指標。 06/15 00:10
6F：→ vita895:check你任一buffer之pH值；APS是否新鮮? 06/15 00:13
7F：推 begrace:Acrylamide換新的看看? 放很久了嗎? 06/15 00:22
8F：→ e5f6:也就是下層膠沒辦法分離 那應該先猜下層膠沒做好 06/17 08:09
9F：→ e5f6:先不要管running buffer， Acrylamide、 APS先配新的 06/17 08:10
10F：→ e5f6:下層膠的TRIS跟上層膠的PH值不同 這個也要注意一下 06/17 08:11
11F：→ Anvec:先看看是不是如同 vita895 說的 maker 保存不當 換管新的跑 06/21 20:17
12F：→ Anvec:或是跟隔壁鄰居借看看 06/21 20:17