作者kvw (Je t'aime)
看板Biotech
标题[求救] SDS PAGE跑胶 marker会糊掉
时间Tue Jun 14 21:37:43 2011
最近跑SDS PAGE时
marker都会糊掉
从stacking下来时会分的很漂亮
但越跑越下面
72kDa以上的marker就会渐渐糊掉
而72以下的marker也会有smear的现象
勉强压完片 high MW的protein都有smear的情形
我用的是12%的胶
上层用80V 下层用100V
之前都没啥问题
但现在却老是出问题
不知道有人遇到过同样的问题吗
希望有高手能伸出援手 拜托了~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 58.115.130.41
1F：→ vita895:smear? 06/14 23:59
2F：→ vita895:可能有很多原因，最有可能是漏胶(胶体结构跑掉了)，还是.. 06/15 00:00
3F：→ vita895:running buffer浓度有误? 甚至maker变质? 06/15 00:09
4F：→ vita895:"stacking下来时会分的很漂亮"也不是SDS-PAGE成功与否的 06/15 00:10
5F：→ vita895:指标。 06/15 00:10
6F：→ vita895:check你任一buffer之pH值；APS是否新鲜? 06/15 00:13
7F：推 begrace:Acrylamide换新的看看? 放很久了吗? 06/15 00:22
8F：→ e5f6:也就是下层胶没办法分离 那应该先猜下层胶没做好 06/17 08:09
9F：→ e5f6:先不要管running buffer， Acrylamide、 APS先配新的 06/17 08:10
10F：→ e5f6:下层胶的TRIS跟上层胶的PH值不同 这个也要注意一下 06/17 08:11
11F：→ Anvec:先看看是不是如同 vita895 说的 maker 保存不当 换管新的跑 06/21 20:17
12F：→ Anvec:或是跟隔壁邻居借看看 06/21 20:17