謝謝雜碎大哥XD 專業的講解非常清楚XD!!超級感謝 因為小弟非生物背景 所以還有很多問題 在下想問清楚!! ※ 引述《Ianthegood (雜碎。)》之銘言： : 同學 : 你可能資料要再看清楚喔 : 電泳是用來分析DNA片段大小用的 : 如果DNA量不夠 : 電泳的靈敏度有限 跑出來還是會看不到 : PCR系列的技術是用來放大DNA片段用的 : 一般都是pcr放大完再用電泳來檢視結果這樣 : 然後你說的那個什麼熱交換 我真的不知道是什麼XD (通常是散熱器吧?) : PCR是利用DNA在不同溫度兩股會分開與重新黏合的概念 : 加上合成酵素適合高溫 DNA再因為熱對流循環會造成三階段溫度 97度左右開始變性 52度左右黏合 74度左右擴增 97度會變性是因為DNA本身到這個溫度就會氫鍵裂解嗎? 還有就是說那您在這邊提到的說到合成酵素適合的高溫 是指說這個熱循環需要黏合的最低溫度是由此酵素決定的嗎? 以高溫低溫的循環讓DNA產生2的N次方的放大(N=cycle數) : 一般都是跑30+cycles 放大幾倍可以自己算一下 : 電泳是把膠體放在溶液裡 : DNA再放在膠體裡 : 溶液通電之後導致大小不同的分子在膠內移動距離不同的現象 : 定量的部份就是染色後這些分子團顯現出的亮度 : 分子越多越亮 : 簡單說就是這樣 : 然後qPCR : 就是你提到的螢光 : 利用的是具有螢光的原料來進行PCR : 所以在每個cycle的放大中螢光就會逐漸增強 : 借此來達到定量的效果 : 那為什麼不全面放棄電泳呢 : 貴阿 : qPCR的機器耗材軟體有的沒的 而且template的純度要求很高 : 比起來電泳的成本跟自來水一樣(菸) 在電泳法對分離開來的分子量做量化處理也是使用螢光染劑? 那跟qpcr這裡的螢光染劑有什麼不同阿? 還有就是real-time pcr 跟qPCR差在哪裡阿? 有網友推文說差再定量方式? 真的很好奇 謝謝您>"< -- --

※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.120.11.174 ※ 編輯: karas888 來自: 140.120.11.175 (06/12 19:57)