谢谢杂碎大哥XD 专业的讲解非常清楚XD!!超级感谢 因为小弟非生物背景 所以还有很多问题 在下想问清楚!! ※ 引述《Ianthegood (杂碎。)》之铭言： : 同学 : 你可能资料要再看清楚喔 : 电泳是用来分析DNA片段大小用的 : 如果DNA量不够 : 电泳的灵敏度有限 跑出来还是会看不到 : PCR系列的技术是用来放大DNA片段用的 : 一般都是pcr放大完再用电泳来检视结果这样 : 然後你说的那个什麽热交换 我真的不知道是什麽XD (通常是散热器吧?) : PCR是利用DNA在不同温度两股会分开与重新黏合的概念 : 加上合成酵素适合高温 DNA再因为热对流循环会造成三阶段温度 97度左右开始变性 52度左右黏合 74度左右扩增 97度会变性是因为DNA本身到这个温度就会氢键裂解吗? 还有就是说那您在这边提到的说到合成酵素适合的高温 是指说这个热循环需要黏合的最低温度是由此酵素决定的吗? 以高温低温的循环让DNA产生2的N次方的放大(N=cycle数) : 一般都是跑30+cycles 放大几倍可以自己算一下 : 电泳是把胶体放在溶液里 : DNA再放在胶体里 : 溶液通电之後导致大小不同的分子在胶内移动距离不同的现象 : 定量的部份就是染色後这些分子团显现出的亮度 : 分子越多越亮 : 简单说就是这样 : 然後qPCR : 就是你提到的萤光 : 利用的是具有萤光的原料来进行PCR : 所以在每个cycle的放大中萤光就会逐渐增强 : 借此来达到定量的效果 : 那为什麽不全面放弃电泳呢 : 贵阿 : qPCR的机器耗材软体有的没的 而且template的纯度要求很高 : 比起来电泳的成本跟自来水一样(菸) 在电泳法对分离开来的分子量做量化处理也是使用萤光染剂? 那跟qpcr这里的萤光染剂有什麽不同阿? 还有就是real-time pcr 跟qPCR差在哪里阿? 有网友推文说差再定量方式? 真的很好奇 谢谢您>"< -- --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 140.120.11.174 ※ 编辑: karas888 来自: 140.120.11.175 (06/12 19:57)