作者Ianthegood (雜碎。)
看板Biotech
標題Re: [討論] PCR技術
時間Sun Jun 12 18:25:07 2011
同學
你可能資料要再看清楚喔
電泳是用來分析DNA片段大小用的
如果DNA量不夠
電泳的靈敏度有限 跑出來還是會看不到
PCR系列的技術是用來放大DNA片段用的
一般都是pcr放大完再用電泳來檢視結果這樣
然後你說的那個什麼熱交換 我真的不知道是什麼XD (通常是散熱器吧?)
PCR是利用DNA在不同溫度兩股會分開與重新黏合的概念
加上合成酵素適合高溫
以高溫低溫的循環讓DNA產生2的N次方的放大(N=cycle數)
一般都是跑30+cycles 放大幾倍可以自己算一下
電泳是把膠體放在溶液裡
DNA再放在膠體裡
溶液通電之後導致大小不同的分子在膠內移動距離不同的現象
定量的部份就是染色後這些分子團顯現出的亮度
分子越多越亮
簡單說就是這樣
然後qPCR
就是你提到的螢光
利用的是具有螢光的原料來進行PCR
所以在每個cycle的放大中螢光就會逐漸增強
借此來達到定量的效果
那為什麼不全面放棄電泳呢
貴阿
qPCR的機器耗材軟體有的沒的 而且template的純度要求很高
比起來電泳的成本跟自來水一樣(菸)
--
人好 欠表
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 110.174.79.41
※ 編輯: Ianthegood 來自: 110.174.79.41 (06/12 18:26)
※ 編輯: Ianthegood 來自: 110.174.79.41 (06/12 18:28)
1F：推 Realthugz:自來水 XD 最值錢的是電泳槽跟casette組 06/12 18:39
2F：→ Ianthegood:電泳槽自己拿壓克力黏就好(大誤) 06/12 18:42
3F：推 FENOR:XD 還要接電線啊! 06/12 18:54
4F：推 Realthugz:照膠系統用紙箱接單眼比較便宜 06/12 18:55
5F：→ gryou:電泳表示：agarose 1g 也要＄5以上 好歹也說我是礦泉水吧！ 06/12 19:04
6F：→ FENOR:而且要做clone，還是少不了電泳啊 06/12 19:20
7F：推 coolbrother:照膠系統接單眼的話都會漏光..膠都不清楚 06/18 00:39