作者Ianthegood (杂碎。)
看板Biotech
标题Re: [讨论] PCR技术
时间Sun Jun 12 18:25:07 2011
同学
你可能资料要再看清楚喔
电泳是用来分析DNA片段大小用的
如果DNA量不够
电泳的灵敏度有限 跑出来还是会看不到
PCR系列的技术是用来放大DNA片段用的
一般都是pcr放大完再用电泳来检视结果这样
然後你说的那个什麽热交换 我真的不知道是什麽XD (通常是散热器吧?)
PCR是利用DNA在不同温度两股会分开与重新黏合的概念
加上合成酵素适合高温
以高温低温的循环让DNA产生2的N次方的放大(N=cycle数)
一般都是跑30+cycles 放大几倍可以自己算一下
电泳是把胶体放在溶液里
DNA再放在胶体里
溶液通电之後导致大小不同的分子在胶内移动距离不同的现象
定量的部份就是染色後这些分子团显现出的亮度
分子越多越亮
简单说就是这样
然後qPCR
就是你提到的萤光
利用的是具有萤光的原料来进行PCR
所以在每个cycle的放大中萤光就会逐渐增强
借此来达到定量的效果
那为什麽不全面放弃电泳呢
贵阿
qPCR的机器耗材软体有的没的 而且template的纯度要求很高
比起来电泳的成本跟自来水一样(菸)
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人好 欠表
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 110.174.79.41
※ 编辑: Ianthegood 来自: 110.174.79.41 (06/12 18:26)
※ 编辑: Ianthegood 来自: 110.174.79.41 (06/12 18:28)
1F：推 Realthugz:自来水 XD 最值钱的是电泳槽跟casette组 06/12 18:39
2F：→ Ianthegood:电泳槽自己拿压克力黏就好(大误) 06/12 18:42
3F：推 FENOR:XD 还要接电线啊! 06/12 18:54
4F：推 Realthugz:照胶系统用纸箱接单眼比较便宜 06/12 18:55
5F：→ gryou:电泳表示：agarose 1g 也要＄5以上 好歹也说我是矿泉水吧！ 06/12 19:04
6F：→ FENOR:而且要做clone，还是少不了电泳啊 06/12 19:20
7F：推 coolbrother:照胶系统接单眼的话都会漏光..胶都不清楚 06/18 00:39