作者ninomae (SPEC)
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標題[求救] ITC來判斷interaction
時間Wed May 25 18:50:47 2011
請問通常拿來titrate的蛋白
濃度最高試到多少才決定這兩個蛋白沒有interaction
有看過試到 1 mM的
真有這個必要嗎
通常大家使用到多高濃度為止就判斷兩者有interaction呢
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◆ From: 111.240.101.48
1F：推 Marriott:濃度算是case by case 05/25 19:24
2F：→ Marriott:從每一次titration的趨勢,基本上能看出有無interaction 05/25 19:26
3F：→ Marriott:濃度設定太高或太低 fitting出來的data會不太準 05/25 19:29
4F：→ Marriott:也不太好看就是 05/25 19:29
5F：→ Marriott:你用的是itc200的話,大致預測Kd value 05/25 19:36
6F：→ Marriott:他會幫你去預設在cell及syringe中合適的濃度 05/25 19:37
7F：→ Marriott:題外話 你用vp-itc的話,1mM protein放cell要1.5ml 05/25 19:42
8F：→ Marriott:多作幾次ITC,光純化protein就不知道要純化多久 05/25 19:46
9F：→ Marriott:我遇過的case,uM就夠了.滴過非protein,才有用到mM這麼高 05/25 19:57
10F：推 chxx:推樓上 ITC要成功要建立在你有超多protein的基礎上 05/25 19:58