作者ninomae (SPEC)
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标题[求救] ITC来判断interaction
时间Wed May 25 18:50:47 2011
请问通常拿来titrate的蛋白
浓度最高试到多少才决定这两个蛋白没有interaction
有看过试到 1 mM的
真有这个必要吗
通常大家使用到多高浓度为止就判断两者有interaction呢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 111.240.101.48
1F：推 Marriott:浓度算是case by case 05/25 19:24
2F：→ Marriott:从每一次titration的趋势,基本上能看出有无interaction 05/25 19:26
3F：→ Marriott:浓度设定太高或太低 fitting出来的data会不太准 05/25 19:29
4F：→ Marriott:也不太好看就是 05/25 19:29
5F：→ Marriott:你用的是itc200的话,大致预测Kd value 05/25 19:36
6F：→ Marriott:他会帮你去预设在cell及syringe中合适的浓度 05/25 19:37
7F：→ Marriott:题外话 你用vp-itc的话,1mM protein放cell要1.5ml 05/25 19:42
8F：→ Marriott:多作几次ITC,光纯化protein就不知道要纯化多久 05/25 19:46
9F：→ Marriott:我遇过的case,uM就够了.滴过非protein,才有用到mM这麽高 05/25 19:57
10F：推 chxx:推楼上 ITC要成功要建立在你有超多protein的基础上 05/25 19:58