※ 引述《mzac1b (Goodday)》之銘言： : 發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出 : 以方便板友幫您追蹤問題 : ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- : 想請教高手兩個問題~~ : 1.一般拿來乘載組織的玻片通常有coating東西 : 這樣的玻片可以 reuse 嗎? : 我是說當你切完片或染完觀察 : 發現不滿意於是 : 把玻璃片上的組織洗掉 : 再重新接組織 : 我個人經驗是處理冰凍切片的組織 : reuse 似乎影響不大 : 不知處理蠟切實玻片 reuse 會不會有影響? : 2.冰凍切片的脂肪組織可以進行 Oil Red O染色嗎? : 雖然看到文獻有用 Oil Red O 染組織上的部分脂肪 : 但我剛試染整塊脂肪 (幾乎九成以上是油脂) : 切片 (切片厚度: 14micro meter) : 似乎油滴會飄起 (已先福馬林固定過) : 而且油會混在一起 : 難以得到完整型態的染色結果 : 所以我有點打算放棄這個實驗 : 因為很難染得完整 : 有人有染過或是否知道好染的方法嗎? : 感謝不吝賜教~ 我之前做大鼠脂肪肝model的實驗, 讀了一些paper, 也有請教過病理科醫師, 因為福馬林會溶解tissue內的油滴, 所以會建議用冷凍切片的方式染Oil red觀察. 在我第一批大鼠model,因為餵食飼料太多, 造成Fatty liver太嚴重 肝臟組織放在生理食鹽水裡面都還會飄起來 @@ 做冷凍切片的染色結果,有一大片一大片油滴聚集的現象 (跟你說的情形有點像) 在第二批修改過餵食條件後, 油滴產生的量沒有那麼多 就可以看到在組織間的小顆粒油滴分布 然後隨著餵食增加,漸漸的油滴會變大顆, 直至最後又變成大片大片的油滴狀了 所以我認為冷凍切片染Oil red的染色方式是OK的! 只是冷凍切片要先切好,不然容易組織破破的 然後Oil red stain, 我唯一的困擾是在染色後殘留一些大顆黑色雜質..疑似沒洗乾淨 Q_Q 那有些paper你可以看到有人用組織塊蠟切片染 HE stain去觀察油滴分布 有不少是因為使用的臨床組織大多已用蠟塊作保存, 而蠟塊無法做Oil red, 所以才用HE stain去觀察 但在做影像定量組織內油滴的paper, 大多都使用冷凍切片染Oil red的染色方式喔 以上, 是我之前自己看一些paper, 和做實驗的一些小小心得, 與你分享. --

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