※ 引述《mzac1b (Goodday)》之铭言： : 发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出 : 以方便板友帮您追踪问题 : ----请将上列注意事项以 ctrl + k 删除後开始编辑文章---- : 想请教高手两个问题~~ : 1.一般拿来乘载组织的玻片通常有coating东西 : 这样的玻片可以 reuse 吗? : 我是说当你切完片或染完观察 : 发现不满意於是 : 把玻璃片上的组织洗掉 : 再重新接组织 : 我个人经验是处理冰冻切片的组织 : reuse 似乎影响不大 : 不知处理蜡切实玻片 reuse 会不会有影响? : 2.冰冻切片的脂肪组织可以进行 Oil Red O染色吗? : 虽然看到文献有用 Oil Red O 染组织上的部分脂肪 : 但我刚试染整块脂肪 (几乎九成以上是油脂) : 切片 (切片厚度: 14micro meter) : 似乎油滴会飘起 (已先福马林固定过) : 而且油会混在一起 : 难以得到完整型态的染色结果 : 所以我有点打算放弃这个实验 : 因为很难染得完整 : 有人有染过或是否知道好染的方法吗? : 感谢不吝赐教~ 我之前做大鼠脂肪肝model的实验, 读了一些paper, 也有请教过病理科医师, 因为福马林会溶解tissue内的油滴, 所以会建议用冷冻切片的方式染Oil red观察. 在我第一批大鼠model,因为喂食饲料太多, 造成Fatty liver太严重 肝脏组织放在生理食盐水里面都还会飘起来 @@ 做冷冻切片的染色结果,有一大片一大片油滴聚集的现象 (跟你说的情形有点像) 在第二批修改过喂食条件後, 油滴产生的量没有那麽多 就可以看到在组织间的小颗粒油滴分布 然後随着喂食增加,渐渐的油滴会变大颗, 直至最後又变成大片大片的油滴状了 所以我认为冷冻切片染Oil red的染色方式是OK的! 只是冷冻切片要先切好,不然容易组织破破的 然後Oil red stain, 我唯一的困扰是在染色後残留一些大颗黑色杂质..疑似没洗乾净 Q_Q 那有些paper你可以看到有人用组织块蜡切片染 HE stain去观察油滴分布 有不少是因为使用的临床组织大多已用蜡块作保存, 而蜡块无法做Oil red, 所以才用HE stain去观察 但在做影像定量组织内油滴的paper, 大多都使用冷冻切片染Oil red的染色方式喔 以上, 是我之前自己看一些paper, 和做实验的一些小小心得, 与你分享. --

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