作者shenhsu (軒)
看板Biotech
標題Re: [求救] SDS-PAGE烘膠問題
時間Fri May 13 11:52:05 2011
※ 引述《kikyoooooooo (kikyo~)》之銘言：
: 大家好，我是遭遇到問題的SDS-PAGE新手
: 我想把gel烘乾，
: 我把退染後的膠體先泡在水裡15-30分鐘，
我們實驗室的做法會先泡在50%酒精+少許glycerol裡
能使膠體脫水(縮小好封pattern也會較清楚)並且也會變硬一些
: 然後，包在浸濕的玻璃紙內，
: 把這個東西以兩片玻璃夾住，
準備一片玻璃墊高上面加水
鋪上第一層浸濕的玻璃紙 (面積須大於玻璃 與玻璃間不能有氣泡)
膠體表面稍微清洗一下後放到玻璃紙上 (同樣不能有氣泡)
加水並鋪上第二層浸濕的玻璃紙 (同樣大於玻璃 也不能有氣泡)
之後將4周超出玻璃部分的玻璃紙 往4周拉緊折到玻璃後面 以長尾夾固定四個角
: 50度或室溫放乾，
: 結果都裂掉了，
放室溫下晾乾 沒試過高溫烘就是了
: 查了一下，發現大多數的人都會接著進行western之類的，
: 不知道我該去哪找到更多的相關訊息，
: 或是有經驗的版大們有甚麼建議呢><
: 3Q
以上是我們LAB的做法 給你參考~
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◆ From: 140.115.48.144
※ 編輯: shenhsu 來自: 140.115.48.144 (05/13 11:53)
1F：推 shiawyee:室溫是照S大的方法，高溫是用gel dryer(邊加溫邊抽氣) 05/13 11:57
2F：→ kikyoooooooo:請問這樣需要用幾片玻璃勒? 05/13 14:33
3F：推 bluecsky:玻璃不就一片 你是想問玻璃紙?? 05/13 14:48
4F：推 kikyoooooooo:我以為需要用兩片玻璃夾住?? 05/13 15:20
5F：→ shenhsu:不用夾啊 底下一片就好 也許就是夾了擠壓到所以破掉? 05/13 18:04
6F：→ e5f6:玻璃只是拿來墊的當墊板，玻璃紙要兩張夾住MEMBRANE 05/14 01:01
7F：推 yaliu:覺得封膠需要練習～像我不常作，膠都要封很久，所以現在我都 05/15 00:39
8F：→ yaliu:拿透明夾鏈袋，把膠放進去，然後氣泡趕一下，就掃描了～ 05/15 00:40
9F：→ yaliu:還蠻清楚的～只是膠無法永久保存～不過照片可以阿 05/15 00:40
10F：推 bluecsky:當你投paper就知道 我隔壁實驗室遇過被要求寄dry的PAGE 05/16 12:06
11F：→ bluecsky:去被審核 原因是因為乾之前跟之後掃起來有差異 他們要看 05/16 12:06
12F：→ bluecsky:重要的data還是好好的封起來保存 免得某一天被要去看 05/16 12:07
13F：→ kikyoooooooo:謝謝大家寶貴的建議，我只能說ptt真是個溫馨的地方>< 05/16 16:13
14F：推 kikyoooooooo:我成功封出美美的膠了!YA~~~感謝大家 05/18 10:58