作者shenhsu (轩)
看板Biotech
标题Re: [求救] SDS-PAGE烘胶问题
时间Fri May 13 11:52:05 2011
※ 引述《kikyoooooooo (kikyo~)》之铭言：
: 大家好，我是遭遇到问题的SDS-PAGE新手
: 我想把gel烘乾，
: 我把退染後的胶体先泡在水里15-30分钟，
我们实验室的做法会先泡在50%酒精+少许glycerol里
能使胶体脱水(缩小好封pattern也会较清楚)并且也会变硬一些
: 然後，包在浸湿的玻璃纸内，
: 把这个东西以两片玻璃夹住，
准备一片玻璃垫高上面加水
铺上第一层浸湿的玻璃纸 (面积须大於玻璃 与玻璃间不能有气泡)
胶体表面稍微清洗一下後放到玻璃纸上 (同样不能有气泡)
加水并铺上第二层浸湿的玻璃纸 (同样大於玻璃 也不能有气泡)
之後将4周超出玻璃部分的玻璃纸 往4周拉紧折到玻璃後面 以长尾夹固定四个角
: 50度或室温放乾，
: 结果都裂掉了，
放室温下晾乾 没试过高温烘就是了
: 查了一下，发现大多数的人都会接着进行western之类的，
: 不知道我该去哪找到更多的相关讯息，
: 或是有经验的版大们有甚麽建议呢><
: 3Q
以上是我们LAB的做法 给你参考~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.115.48.144
※ 编辑: shenhsu 来自: 140.115.48.144 (05/13 11:53)
1F：推 shiawyee:室温是照S大的方法，高温是用gel dryer(边加温边抽气) 05/13 11:57
2F：→ kikyoooooooo:请问这样需要用几片玻璃勒? 05/13 14:33
3F：推 bluecsky:玻璃不就一片 你是想问玻璃纸?? 05/13 14:48
4F：推 kikyoooooooo:我以为需要用两片玻璃夹住?? 05/13 15:20
5F：→ shenhsu:不用夹啊 底下一片就好 也许就是夹了挤压到所以破掉? 05/13 18:04
6F：→ e5f6:玻璃只是拿来垫的当垫板，玻璃纸要两张夹住MEMBRANE 05/14 01:01
7F：推 yaliu:觉得封胶需要练习～像我不常作，胶都要封很久，所以现在我都 05/15 00:39
8F：→ yaliu:拿透明夹链袋，把胶放进去，然後气泡赶一下，就扫描了～ 05/15 00:40
9F：→ yaliu:还蛮清楚的～只是胶无法永久保存～不过照片可以阿 05/15 00:40
10F：推 bluecsky:当你投paper就知道 我隔壁实验室遇过被要求寄dry的PAGE 05/16 12:06
11F：→ bluecsky:去被审核 原因是因为乾之前跟之後扫起来有差异 他们要看 05/16 12:06
12F：→ bluecsky:重要的data还是好好的封起来保存 免得某一天被要去看 05/16 12:07
13F：→ kikyoooooooo:谢谢大家宝贵的建议，我只能说ptt真是个温馨的地方>< 05/16 16:13
14F：推 kikyoooooooo:我成功封出美美的胶了!YA~~~感谢大家 05/18 10:58