作者premire (熱騰騰的泡麵)
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標題[求救] 有沒有人用過gel filtration???
時間Thu Apr 28 11:04:08 2011
小弟目前使用Hitrap desalting column進行gel filtration
這類columng是利用size exclution方式分離純化
我的inj sample是兩個分子量差距極大的protein 目的是要把大分子純化
但是一方面也想看看小分子多久會沖提出來
最近可以看到大分子很快就出來了
假設sample沒有和media binding 打入與column volumn同體積的buffer之內就會沖出來
但是結果小分子遲遲都沒有看到
可能的原因有：
(1)小分子protein跑到column的media(dextran)並且binding
(2)我的buffer條件（目前先使用含0.5 mM DTPA PBS）
有使用經驗的版上大大能否分享經驗呢
不勝感激！！！
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 210.60.122.10
1F：推 dodomilk:大分子小分子分別多大？ 04/28 12:58
2F：→ premire:大的36000 小的約400 04/28 13:02
3F：推 dodomilk:單位是AA嗎？ 04/28 13:17
4F：→ premire:單位是Da 04/28 13:32
5F：推 dodomilk:那小的也太小了一點，4個AA？ 04/28 14:40
6F：→ dodomilk:沖到兩個CV都還沒沖出來嗎？ 04/28 14:41
7F：→ premire:小的是GSH 沖了2CV（約10ml）也沒看到＝＝ 04/28 15:03
8F：推 dodomilk:你用什麼方法測GSH有沒有elute出來？ 04/28 15:41
9F：→ premire:測UV280 04/28 22:45
10F：推 dodomilk:280測不出來很正常，因為GSH沒有共振環 04/29 09:13
11F：→ dodomilk:下篇版友的回文有詳細說明 04/29 09:14
12F：→ premire:感謝樓上的熱心解說！！ 04/29 10:17