作者premire (热腾腾的泡面)
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标题[求救] 有没有人用过gel filtration???
时间Thu Apr 28 11:04:08 2011
小弟目前使用Hitrap desalting column进行gel filtration
这类columng是利用size exclution方式分离纯化
我的inj sample是两个分子量差距极大的protein 目的是要把大分子纯化
但是一方面也想看看小分子多久会冲提出来
最近可以看到大分子很快就出来了
假设sample没有和media binding 打入与column volumn同体积的buffer之内就会冲出来
但是结果小分子迟迟都没有看到
可能的原因有：
(1)小分子protein跑到column的media(dextran)并且binding
(2)我的buffer条件（目前先使用含0.5 mM DTPA PBS）
有使用经验的版上大大能否分享经验呢
不胜感激！！！
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 210.60.122.10
1F：推 dodomilk:大分子小分子分别多大？ 04/28 12:58
2F：→ premire:大的36000 小的约400 04/28 13:02
3F：推 dodomilk:单位是AA吗？ 04/28 13:17
4F：→ premire:单位是Da 04/28 13:32
5F：推 dodomilk:那小的也太小了一点，4个AA？ 04/28 14:40
6F：→ dodomilk:冲到两个CV都还没冲出来吗？ 04/28 14:41
7F：→ premire:小的是GSH 冲了2CV（约10ml）也没看到＝＝ 04/28 15:03
8F：推 dodomilk:你用什麽方法测GSH有没有elute出来？ 04/28 15:41
9F：→ premire:测UV280 04/28 22:45
10F：推 dodomilk:280测不出来很正常，因为GSH没有共振环 04/29 09:13
11F：→ dodomilk:下篇版友的回文有详细说明 04/29 09:14
12F：→ premire:感谢楼上的热心解说！！ 04/29 10:17