作者zz55 (ss)
看板Biotech
標題[求救] 冷凍細胞
時間Wed Apr 13 16:32:40 2011
想請問細胞在儲存時
1.4度的步驟是有必要的嗎
2.為了避免DMSO毒性，我會略過4度直接到-20度 (2~3小時)
那2~3小時這時間有一定要更短或更長嗎
3.如果沒有-80冰箱，可以在-20之後直接放到液態氮嗎
謝謝大家的回答~!!
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◆ From: 140.112.182.161
1F：→ spirithorse:急速冷凍的話,細胞內會有冰晶產生,解凍細胞容易死喔~ 04/13 18:15
2F：→ alicialai:看細胞吧~~ 我有時候只有放冰上30min就丟LN2了~~ 04/13 20:44
3F：→ alicialai:但是我是用FCS當冷凍液的base喔~~ 04/13 20:45
4F：→ alicialai:或者是用Isoproponal盒, 丟-80 O/N就可以進LN2了 04/13 20:47
5F：→ alicialai:by the way, 當然還是慢慢降溫對細胞最不會傷~~~ 04/13 20:47
6F：推 leoblack:凍細胞~降溫越慢越好(1度/1min),解凍細胞,回溫越快越好 04/13 22:15
7F：推 HEK293:Mr. Frosty好用，可是要替換isopropanol。最近有出另一種 04/14 09:05
8F：→ HEK293:是中間有個金屬塊，可以保證一分鐘降一度的~ 04/14 09:05
9F：推 allisa:我有用過中間有金屬塊的 方便! 不用換isopropanol~ 04/14 16:43
10F：推 liner76:沒冷凍盒，就用盒璧有5cm厚的保麗龍盒，效果也很好！ 04/15 16:31
11F：→ chvkimo:沒有-80 那我會跟其他實驗室借個小位子 應該OK吧! 04/27 02:11
12F：→ christymei:我的印象是-20不要超過半小時耶不然會有冰晶 04/29 23:40