作者zz55 (ss)
看板Biotech
标题[求救] 冷冻细胞
时间Wed Apr 13 16:32:40 2011
想请问细胞在储存时
1.4度的步骤是有必要的吗
2.为了避免DMSO毒性,我会略过4度直接到-20度 (2~3小时)
那2~3小时这时间有一定要更短或更长吗
3.如果没有-80冰箱,可以在-20之後直接放到液态氮吗
谢谢大家的回答~!!
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◆ From: 140.112.182.161
1F:→ spirithorse:急速冷冻的话,细胞内会有冰晶产生,解冻细胞容易死喔~ 04/13 18:15
2F:→ alicialai:看细胞吧~~ 我有时候只有放冰上30min就丢LN2了~~ 04/13 20:44
3F:→ alicialai:但是我是用FCS当冷冻液的base喔~~ 04/13 20:45
4F:→ alicialai:或者是用Isoproponal盒, 丢-80 O/N就可以进LN2了 04/13 20:47
5F:→ alicialai:by the way, 当然还是慢慢降温对细胞最不会伤~~~ 04/13 20:47
6F:推 leoblack:冻细胞~降温越慢越好(1度/1min),解冻细胞,回温越快越好 04/13 22:15
7F:推 HEK293:Mr. Frosty好用,可是要替换isopropanol。最近有出另一种 04/14 09:05
8F:→ HEK293:是中间有个金属块,可以保证一分钟降一度的~ 04/14 09:05
9F:推 allisa:我有用过中间有金属块的 方便! 不用换isopropanol~ 04/14 16:43
10F:推 liner76:没冷冻盒,就用盒璧有5cm厚的保丽龙盒,效果也很好! 04/15 16:31
11F:→ chvkimo:没有-80 那我会跟其他实验室借个小位子 应该OK吧! 04/27 02:11
12F:→ christymei:我的印象是-20不要超过半小时耶不然会有冰晶 04/29 23:40