作者ninomae (SPEC)
站內Biotech
標題[閒聊] 蛋白質定量方法
時間Sun Apr 3 16:26:33 2011
有人是用280 nm吸收,用beer's law來換算濃度
有人是用BSA來當標準品來換算
若是粉狀的天然或動植物萃取抽乾後的蛋白質,可用稱的直接換算
(但有人提到會有水氣= =,有差這麼多嗎? 要是全乾應該就很少)
而最好的方法是用ELISA吧,若是有這蛋白質的標準品和抗體,最好還有內標品
大家是用甚麼方法定量蛋白質呢
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 111.240.97.165
1F:推 tingyang:protein assay 04/03 17:02
2F:→ bill90128:Bradford assay 04/03 20:44
阿 第二行就是說Bradford,想請問用280 nm的吸收也就是第一行講的方法準嗎
※ 編輯: ninomae 來自: 111.240.97.165 (04/03 20:56)
3F:推 missal:用280nm我會把protein denature之後量 04/03 23:31
4F:推 killmebaby:Bradford不是測280吧, 是測coomassie blue 595 nm 04/03 23:43
5F:推 missal:我用280nm量(denature狀況下)用來作ITC的sample 04/04 00:27
6F:→ missal:ITC做的是protein-protein binding 最後fitting的時候 04/04 00:28
7F:→ missal:stoicheometry N是1.05左右 所以我覺得還蠻準確的 給你參考 04/04 00:30
8F:推 premire:請問如果樣品不是BSA 那麼如何把BSA當標準品換算呢 04/06 21:02