作者soom ()
看板Biotech
標題Re: [實驗] 電泳膠體的製備
時間Fri Mar 25 15:29:24 2011
※ 引述《euphonium15 (心動夢幻)》之銘言：
: 上網查了一些資料~發現似乎跟跑電泳用的膠體類似~
: 根據文獻~原PO使用了下面的步驟:
: 1. 25mL 15% Acrylamide+7.5mL 0.3% Agarose+ 17.5mL DI Water當stock solution.
: 2. 取10mL stock solution加入70uL Ammonium persulfate以及20uL TEMED充分混合.
: 3. 裝入holder後,迅速放入約40度左右的烘箱約60分鐘.
你的膠體最終濃度是7.5%左右，這個濃度純acrylamide的0.5 mm膠會真的蠻軟的
不過應該還是會凝，而不是膠水狀
應該是不會因為廠牌差很多，倒是跟藥品的年紀有點關係
Ammonium persulfate現配的效果會比較好，TEMED如果放很久了效果也會有差
這兩個多加會比較快凝，但不建議加太多
跟容器的形狀應該不會有太大關係，因為我配膠時剩餘的膠液放在燒杯裡也會凝
更何況1mm跟1.5mm都是很常用的acrylamide膠厚度
有聽說有人是配完後放進微波爐烤一兩分鐘就凝了，不過我一直沒膽這樣做
而且你的配方裡有agarose，我不確定太熱會不會有影響
最後，貴校生科系會做的人不少，也有專門用來做電泳膠的容器，不妨直接找他們
討論甚至是請他們指導，應該會更有幫忙才對。
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◆ From: 120.126.34.204
1F：推 HEK293:APS要閉光。 03/25 15:31
2F：→ soom:推樓上，我都是用錫箔紙包著避光 03/25 15:34
3F：→ allisa:我都沒避光耶 不過融解後會冰4度保存 一個月內用完~ 03/25 16:23
4F：→ soom:版友提到用微波加熱有弄破玻璃的危險，請小心為上 10/20 13:00