作者soom ()
看板Biotech
标题Re: [实验] 电泳胶体的制备
时间Fri Mar 25 15:29:24 2011
※ 引述《euphonium15 (心动梦幻)》之铭言：
: 上网查了一些资料~发现似乎跟跑电泳用的胶体类似~
: 根据文献~原PO使用了下面的步骤:
: 1. 25mL 15% Acrylamide+7.5mL 0.3% Agarose+ 17.5mL DI Water当stock solution.
: 2. 取10mL stock solution加入70uL Ammonium persulfate以及20uL TEMED充分混合.
: 3. 装入holder後,迅速放入约40度左右的烘箱约60分钟.
你的胶体最终浓度是7.5%左右，这个浓度纯acrylamide的0.5 mm胶会真的蛮软的
不过应该还是会凝，而不是胶水状
应该是不会因为厂牌差很多，倒是跟药品的年纪有点关系
Ammonium persulfate现配的效果会比较好，TEMED如果放很久了效果也会有差
这两个多加会比较快凝，但不建议加太多
跟容器的形状应该不会有太大关系，因为我配胶时剩余的胶液放在烧杯里也会凝
更何况1mm跟1.5mm都是很常用的acrylamide胶厚度
有听说有人是配完後放进微波炉烤一两分钟就凝了，不过我一直没胆这样做
而且你的配方里有agarose，我不确定太热会不会有影响
最後，贵校生科系会做的人不少，也有专门用来做电泳胶的容器，不妨直接找他们
讨论甚至是请他们指导，应该会更有帮忙才对。
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 120.126.34.204
1F：推 HEK293:APS要闭光。 03/25 15:31
2F：→ soom:推楼上，我都是用锡箔纸包着避光 03/25 15:34
3F：→ allisa:我都没避光耶 不过融解後会冰4度保存 一个月内用完~ 03/25 16:23
4F：→ soom:版友提到用微波加热有弄破玻璃的危险，请小心为上 10/20 13:00