作者Johnpolo (隱行)
站內Biotech
標題[求救] 請問關於T4 ligation
時間Tue Mar 22 10:54:05 2011
因本人現在見習的實驗室是使用Promege T4 lagation kit
有一個問題很好奇 一般要ligation不是要用限制酶先切嗎?
切完才能ligation吧! 這個不用嗎?
還是說這個是限制酶和內切酶一起加進去
那這個要找出切點嗎？
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
1F：→ iceking:不懂~ 不切還需要ligate嗎? 03/22 10:58
2F：→ Johnpolo:實驗室的人說 不用切 直接把要insert的DNA放入kit 03/22 11:08
3F：→ Johnpolo:這樣就會接合 我實在搞不懂 為何不用切 03/22 11:09
4F：→ potter:我想到是像TA cloning 03/22 12:20
5F：→ f9361046:同意樓上 03/22 12:35
6F：推 yaliu:去要一下說明書看看就知道了 03/22 13:33
7F：→ yaprint:是要接PCR產物進去對吧! 03/22 16:16
8F：→ Johnpolo:對是接PCR後的vector進去 03/22 19:10
9F：→ david6602ok:看一下pGEM-T的protocol吧! 03/22 23:54
10F：推 kakaman:說明書上有寫~~ 03/23 00:36
11F：推 skyken10:如果有T4 polymerase+T4 kinase+T4 ligase~就一次搞定~! 03/23 12:06
12F：→ alicialai:promega T4 ligate kit只有provide T4 ligase和buffer 03/25 05:44
13F：→ alicialai:不切怎麼接的進去~ 除非是他家另一個產品pGEM-T kit~ 03/25 05:45
14F：→ alicialai:也是provide the same ligase and buffer 03/25 05:46
15F：→ alicialai:但有多一管vector (綠蓋蓋) 03/25 05:46
16F：→ alicialai:ㄟ不對! T4是綠蓋蓋, pGEM-T是黃蓋蓋才對~~ XDD 03/25 05:47
17F：→ alicialai:你看看你用的是哪種產品就知道囉~ 03/25 05:48
※ 編輯: Johnpolo 來自: 114.32.49.184 (06/16 14:59)