作者Johnpolo (隐行)
站内Biotech
标题[求救] 请问关於T4 ligation
时间Tue Mar 22 10:54:05 2011
因本人现在见习的实验室是使用Promege T4 lagation kit
有一个问题很好奇 一般要ligation不是要用限制酶先切吗?
切完才能ligation吧! 这个不用吗?
还是说这个是限制酶和内切酶一起加进去
那这个要找出切点吗？
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
1F：→ iceking:不懂~ 不切还需要ligate吗? 03/22 10:58
2F：→ Johnpolo:实验室的人说 不用切 直接把要insert的DNA放入kit 03/22 11:08
3F：→ Johnpolo:这样就会接合 我实在搞不懂 为何不用切 03/22 11:09
4F：→ potter:我想到是像TA cloning 03/22 12:20
5F：→ f9361046:同意楼上 03/22 12:35
6F：推 yaliu:去要一下说明书看看就知道了 03/22 13:33
7F：→ yaprint:是要接PCR产物进去对吧! 03/22 16:16
8F：→ Johnpolo:对是接PCR後的vector进去 03/22 19:10
9F：→ david6602ok:看一下pGEM-T的protocol吧! 03/22 23:54
10F：推 kakaman:说明书上有写~~ 03/23 00:36
11F：推 skyken10:如果有T4 polymerase+T4 kinase+T4 ligase~就一次搞定~! 03/23 12:06
12F：→ alicialai:promega T4 ligate kit只有provide T4 ligase和buffer 03/25 05:44
13F：→ alicialai:不切怎麽接的进去~ 除非是他家另一个产品pGEM-T kit~ 03/25 05:45
14F：→ alicialai:也是provide the same ligase and buffer 03/25 05:46
15F：→ alicialai:但有多一管vector (绿盖盖) 03/25 05:46
16F：→ alicialai:ㄟ不对! T4是绿盖盖, pGEM-T是黄盖盖才对~~ XDD 03/25 05:47
17F：→ alicialai:你看看你用的是哪种产品就知道罗~ 03/25 05:48
※ 编辑: Johnpolo 来自: 114.32.49.184 (06/16 14:59)