作者familys (思源埡口)
看板Biotech
標題Re: [求救] 骨頭切片antigen retrivel的方法
時間Mon Mar 21 20:26:48 2011
※ 引述《hchung (hiflypig)》之銘言：
: 恩~我後來自己泡20%的EDTA，
: 配方是用40cc的三次水，加上10g的EDTA
: 接著加10N的NaOH，到EDTA都溶了。
: 再用HCl去滴定到pH7.0
: 可是我就看到EDTA又被析出來了>"<
: 我知道EDTA很難溶，所以用NaOH讓它溶...沒想到竟然不聽話。
: 哀...請問大家有什麼溶EDTA的小秘訣嗎???
把EDTA加水後放在攪拌器上攪 不需要加熱 就讓它一直轉就好
PH meter直接插在裡面測
慢慢加入10N的NaOH 一直加到PH7.0就好
攪了一陣子PH會再往下掉 再加一點10N的NaOH
一直保持在PH 7.0就好
反覆一直慢慢加 直到整瓶變透明後 再補水補到20%的濃度即可
不需要用到HCl
這個過程需要一點時間 要有耐心一點 所以我都一次泡2000c.c.
因為我沒什麼耐心 所以一次泡很多慢慢用
反正那麼高濃度的EDTA也不容易長菌 可以放很久都不會壞
也因為我沒什麼耐心 有時我都直接加整顆沒泡過的NaOH
不過千萬別一次加太多 一樣也是慢慢加就好 溶掉後再加
等到快變透明時 再用泡好的10N NaOH慢慢滴 這樣我就不用一直泡NaOH
老實講泡10N的NaOH我也都會怕怕的 因為會很燙
我都先裝一桶碎冰放在Hood裡面隔著玻璃門泡 雖然說不需要這樣小心
但是我怕死嘛.....萬一一個不小心噴到臉 就沒有人要我了 XDDD
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◆ From: 61.217.97.43
1F：推 hchung:感謝你啦~~明天再來試試^^ 03/22 00:29
2F：推 hchung:可以請問大概要溶多久嗎?我stir快三天了~底下還一堆沉澱物 03/25 00:37
3F：→ alicialai:直接泡大量比較好配~ 之前我配0.5M EDTA + 20g NaOH 03/25 05:58
4F：→ alicialai:就丟著讓他溶掉然後pH就正好在約7.8-8的地方~ 03/25 05:59
5F：→ familys:不然你PH調到7.4試試 不要超過8.0都可以 03/25 20:35
6F：→ familys:水多加一點點 我都是水加到1800~1900才開始調PH值 03/25 20:36