作者familys (思源垭口)
看板Biotech
标题Re: [求救] 骨头切片antigen retrivel的方法
时间Mon Mar 21 20:26:48 2011
※ 引述《hchung (hiflypig)》之铭言：
: 恩~我後来自己泡20%的EDTA，
: 配方是用40cc的三次水，加上10g的EDTA
: 接着加10N的NaOH，到EDTA都溶了。
: 再用HCl去滴定到pH7.0
: 可是我就看到EDTA又被析出来了>"<
: 我知道EDTA很难溶，所以用NaOH让它溶...没想到竟然不听话。
: 哀...请问大家有什麽溶EDTA的小秘诀吗???
把EDTA加水後放在搅拌器上搅 不需要加热 就让它一直转就好
PH meter直接插在里面测
慢慢加入10N的NaOH 一直加到PH7.0就好
搅了一阵子PH会再往下掉 再加一点10N的NaOH
一直保持在PH 7.0就好
反覆一直慢慢加 直到整瓶变透明後 再补水补到20%的浓度即可
不需要用到HCl
这个过程需要一点时间 要有耐心一点 所以我都一次泡2000c.c.
因为我没什麽耐心 所以一次泡很多慢慢用
反正那麽高浓度的EDTA也不容易长菌 可以放很久都不会坏
也因为我没什麽耐心 有时我都直接加整颗没泡过的NaOH
不过千万别一次加太多 一样也是慢慢加就好 溶掉後再加
等到快变透明时 再用泡好的10N NaOH慢慢滴 这样我就不用一直泡NaOH
老实讲泡10N的NaOH我也都会怕怕的 因为会很烫
我都先装一桶碎冰放在Hood里面隔着玻璃门泡 虽然说不需要这样小心
但是我怕死嘛.....万一一个不小心喷到脸 就没有人要我了 XDDD
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 61.217.97.43
1F：推 hchung:感谢你啦~~明天再来试试^^ 03/22 00:29
2F：推 hchung:可以请问大概要溶多久吗?我stir快三天了~底下还一堆沉淀物 03/25 00:37
3F：→ alicialai:直接泡大量比较好配~ 之前我配0.5M EDTA + 20g NaOH 03/25 05:58
4F：→ alicialai:就丢着让他溶掉然後pH就正好在约7.8-8的地方~ 03/25 05:59
5F：→ familys:不然你PH调到7.4试试 不要超过8.0都可以 03/25 20:35
6F：→ familys:水多加一点点 我都是水加到1800~1900才开始调PH值 03/25 20:36