作者lancerjojo (JOJO)
看板Biotech
標題[求救] 蛋白質溶於sample buffer後產生沉澱
時間Thu Mar 3 12:57:44 2011
各位前輩
小弟在做蛋白質純化的時候
產生了一些問題
我是用RIPA來做蛋白質萃取
最後以15000 RPM離心取上清液
保存在-20度C
結果在經過一兩次跑WB之後
SAMPLE開始產生沉澱
有白色棉絮狀的物體出現
有的直接產生沉澱在管底
請問這是蛋白質再析出嗎?
不知道有甚麼方法可以將他在回溶於BUFFER中的?
謝個各位學長姐
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 210.60.122.14
1F：→ huosheng:有時候析出的不見得是你的蛋白 有可能是其它的雜蛋白 03/03 14:02
2F：→ huosheng:建議你離心之後跑個PAGE確定看看吧 03/03 14:03
3F：→ lancerjojo:最近一次跑WB的結果是表現亮有非常顯著的差異 03/03 14:34
4F：→ lancerjojo:我每次跑的時候也會先VORTEX再離心 03/03 14:58
5F：→ gryou:SDS沈澱？？ 03/03 18:31
6F：推 vbhero:有沒有照片 03/04 11:20
7F：→ jamesonly:我也是煮完放冰上放久了會沉澱... 03/05 23:46
8F：→ jamesonly:打原在跑WB，跑出來沒影響... 03/05 23:46