作者lancerjojo (JOJO)
看板Biotech
标题[求救] 蛋白质溶於sample buffer後产生沉淀
时间Thu Mar 3 12:57:44 2011
各位前辈
小弟在做蛋白质纯化的时候
产生了一些问题
我是用RIPA来做蛋白质萃取
最後以15000 RPM离心取上清液
保存在-20度C
结果在经过一两次跑WB之後
SAMPLE开始产生沉淀
有白色棉絮状的物体出现
有的直接产生沉淀在管底
请问这是蛋白质再析出吗?
不知道有甚麽方法可以将他在回溶於BUFFER中的?
谢个各位学长姐
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 210.60.122.14
1F：→ huosheng:有时候析出的不见得是你的蛋白 有可能是其它的杂蛋白 03/03 14:02
2F：→ huosheng:建议你离心之後跑个PAGE确定看看吧 03/03 14:03
3F：→ lancerjojo:最近一次跑WB的结果是表现亮有非常显着的差异 03/03 14:34
4F：→ lancerjojo:我每次跑的时候也会先VORTEX再离心 03/03 14:58
5F：→ gryou:SDS沈淀？？ 03/03 18:31
6F：推 vbhero:有没有照片 03/04 11:20
7F：→ jamesonly:我也是煮完放冰上放久了会沉淀... 03/05 23:46
8F：→ jamesonly:打原在跑WB，跑出来没影响... 03/05 23:46