作者owl628 (owl628)
看板Biotech
標題[求救] 一些關於blocking的問題
時間Sun Feb 20 00:58:03 2011
因為最近開始接觸western跟ICC
大部份都是到處問人以及上網找資料做的
因此有些關於blocking的部分有點疑問
blocking中使用的脫脂牛奶裡面的蛋白質會均勻的附著在你的membrane上
藉此避免後續的抗體反應造成一些非專一性的結合
想請問這裡所說的後續抗體,是指一抗或二抗,或是都是
此外有看到說假如進行有關磷酸化蛋白的WB
就只能用BSA進行blocking,是因為牛奶中含有磷酸化的蛋白質嗎???
最後就是進行ICC時他的blocking buffer要針對二抗來選擇
假如二抗是goat anti-mouse,就要用normal goat serum,有點不懂原理為何???
不能用牛奶,BSA之類的嗎???
上面三個問題麻煩知道的人可以解釋一下,拜託大家了,謝謝~
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