作者owl628 (owl628)
看板Biotech
标题[求救] 一些关於blocking的问题
时间Sun Feb 20 00:58:03 2011
因为最近开始接触western跟ICC
大部份都是到处问人以及上网找资料做的
因此有些关於blocking的部分有点疑问
blocking中使用的脱脂牛奶里面的蛋白质会均匀的附着在你的membrane上
藉此避免後续的抗体反应造成一些非专一性的结合
想请问这里所说的後续抗体,是指一抗或二抗,或是都是
此外有看到说假如进行有关磷酸化蛋白的WB
就只能用BSA进行blocking,是因为牛奶中含有磷酸化的蛋白质吗???
最後就是进行ICC时他的blocking buffer要针对二抗来选择
假如二抗是goat anti-mouse,就要用normal goat serum,有点不懂原理为何???
不能用牛奶,BSA之类的吗???
上面三个问题麻烦知道的人可以解释一下,拜托大家了,谢谢~
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