作者doban (...)
看板Biotech
標題[求救] 15% SDS gel
時間Thu Feb 10 15:12:59 2011
最近在跑15% SDS gel時
跑到最後dye跟11kDa的marker之間會有一層淡藍色出現
感覺就像dye暈開一樣
由於我自己的protein為11kDa
做完western壓片後會壓不到band
或是band呈現波浪狀
(感覺protein沒跑完卡在一起的樣子)
要請教各位這是哪裡出了問題
謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 163.15.154.12
1F：推 kingtiger:煮protein的時候沒有煮的很完全會造成dye和蛋白分開 02/10 15:57
2F：→ kingtiger:可用95度以上煮10mins,並立刻跑膠 02/10 15:58
3F：→ kingtiger:western的部分,若尚未跳海,可再跑開一點 02/10 15:59
4F：→ kingtiger:有可能你鑄膠時下半的膠凝固的不好 02/10 16:01
5F：→ kingtiger:跑比較小的蛋白的時候可以考慮做長的膠 02/10 16:01
6F：推 ayutu7673:個人經驗測漏的水要吸乾,否則跑到底下時會怪怪的 02/10 16:30
7F：推 ROKEE:個人經驗,高濃度PAGE可是小分子蛋白看不到,是APS不夠新鮮! 02/10 21:02