作者doban (...)
看板Biotech
标题[求救] 15% SDS gel
时间Thu Feb 10 15:12:59 2011
最近在跑15% SDS gel时
跑到最後dye跟11kDa的marker之间会有一层淡蓝色出现
感觉就像dye晕开一样
由於我自己的protein为11kDa
做完western压片後会压不到band
或是band呈现波浪状
(感觉protein没跑完卡在一起的样子)
要请教各位这是哪里出了问题
谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.15.154.12
1F：推 kingtiger:煮protein的时候没有煮的很完全会造成dye和蛋白分开 02/10 15:57
2F：→ kingtiger:可用95度以上煮10mins,并立刻跑胶 02/10 15:58
3F：→ kingtiger:western的部分,若尚未跳海,可再跑开一点 02/10 15:59
4F：→ kingtiger:有可能你铸胶时下半的胶凝固的不好 02/10 16:01
5F：→ kingtiger:跑比较小的蛋白的时候可以考虑做长的胶 02/10 16:01
6F：推 ayutu7673:个人经验测漏的水要吸乾,否则跑到底下时会怪怪的 02/10 16:30
7F：推 ROKEE:个人经验,高浓度PAGE可是小分子蛋白看不到,是APS不够新鲜! 02/10 21:02