※ 引述《waitingu (Phil-Ku)》之銘言： : ※ 引述《waitingu (Phil-Ku)》之銘言： : 推文的Ca++,Mg++離子free PBS上次試了一下，可能是因為我只有最後回溶細胞時用 : 所以最後還是有一點細胞聚集的感覺(約半小時~一小時後) : (感謝版友分享，點醒夢中人XD) : 而打老鼠用的是25號針，可能是太久沒打了，兩小時只成功了兩隻(100%打進去的) : (上次是一年多前打，老鼠品系是比較不會亂動的null mice) : 有時候找到血管推進去，突然給你抖一下，結果就又跑掉了@@" : 跟同學討論了一下，好像也有人用29號針頭(insulin注射用) : 聽說比較好找到血管(不怕亂動)，但會怕細胞破掉(他們用了MCF-7或是HEP-3B是不會破) : 不知道大家有沒有用HEK293過29號針的經驗呢@@" 或是我可以簡單的過針頭後再去顯微鏡 : 下觀察細胞?! : (用過針頭的方式破細胞，不知道要多大力；幾號針) : 感謝回答~ 終於趕在過年前處裡完所有老鼠 來報告一下這幾次實驗的心得 如果HEK293細胞用PBS(含二價離子)回溶，約10分鐘之後細胞就會aggregate到 針頭無法吸取的程度 若是用不含二價離子的PBS回溶，大約可以撐半小時到一小時 但神奇的是，用OPTI-MEM回溶的話，可以撐完約兩小時的實驗(約30隻小鼠尾靜脈注射) 完全沒有aggregate現象，目前兩天過去小鼠也都活蹦亂跳的 之前主要是對於施打非PBS的溶液進入老鼠體內感到疑惑，paper也很少看到這種作法 問了一下學長，為什麼paper都沒有看過這種protocol呢？ 他只回了說：寫在paper上的不一定跟實際做的一樣XD 以後如果也有碰到很會aggregate的細胞，不妨用OPTI-MEM試試看^^ --

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