※ 引述《waitingu (Phil-Ku)》之铭言： : ※ 引述《waitingu (Phil-Ku)》之铭言： : 推文的Ca++,Mg++离子free PBS上次试了一下，可能是因为我只有最後回溶细胞时用 : 所以最後还是有一点细胞聚集的感觉(约半小时~一小时後) : (感谢版友分享，点醒梦中人XD) : 而打老鼠用的是25号针，可能是太久没打了，两小时只成功了两只(100%打进去的) : (上次是一年多前打，老鼠品系是比较不会乱动的null mice) : 有时候找到血管推进去，突然给你抖一下，结果就又跑掉了@@" : 跟同学讨论了一下，好像也有人用29号针头(insulin注射用) : 听说比较好找到血管(不怕乱动)，但会怕细胞破掉(他们用了MCF-7或是HEP-3B是不会破) : 不知道大家有没有用HEK293过29号针的经验呢@@" 或是我可以简单的过针头後再去显微镜 : 下观察细胞?! : (用过针头的方式破细胞，不知道要多大力；几号针) : 感谢回答~ 终於赶在过年前处里完所有老鼠 来报告一下这几次实验的心得 如果HEK293细胞用PBS(含二价离子)回溶，约10分钟之後细胞就会aggregate到 针头无法吸取的程度 若是用不含二价离子的PBS回溶，大约可以撑半小时到一小时 但神奇的是，用OPTI-MEM回溶的话，可以撑完约两小时的实验(约30只小鼠尾静脉注射) 完全没有aggregate现象，目前两天过去小鼠也都活蹦乱跳的 之前主要是对於施打非PBS的溶液进入老鼠体内感到疑惑，paper也很少看到这种作法 问了一下学长，为什麽paper都没有看过这种protocol呢？ 他只回了说：写在paper上的不一定跟实际做的一样XD 以後如果也有碰到很会aggregate的细胞，不妨用OPTI-MEM试试看^^ --

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