作者Kurihara (不理不理)
看板Biotech
標題[求救] IHC 切片部份的問題
時間Thu Jan 20 00:50:45 2011
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
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我做的是果蠅腦的冷凍切片
參照PAPER上的作法 用福馬林固定之後
蔗糖脫水之後去切片
做法是先將果蠅的嘴器拔掉 讓福馬林或是蔗糖從這裡滲入
之前會先用福馬林固定2個小時 再用蔗糖脫水不到24小時
結果切出來 被說腦脫水脫太多 萎縮了
後來只用福馬林固定overnight 直接去切
果然如預期的腦切片一個洞一個洞
不知道大家有沒有遇過類似的狀況
麻煩大家給個建議吧 拜託拜託
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◆ From: 114.26.164.28
※ 編輯: Kurihara 來自: 114.26.164.28 (01/20 00:55)
1F：推 aeroufo:如果切完再rehydride呢??應該可以吧因為不是上電顯的片 01/20 12:34
2F：推 nexusfantasy:蔗糖的濃度是？ 01/20 15:23
3F：推 Rodrigo:厚度?切下來馬上貼玻片? 01/20 20:10
4F：→ Kurihara:感謝一樓 我去試試看 最後要看confocal 的 01/20 22:47
5F：→ Kurihara:蔗糖濃度是百分之三十 切完要到三抗再貼片 01/20 22:47
6F：→ Kurihara:厚度從20 到40 micrometer 都有試過 01/20 22:52
7F：推 nexusfantasy:降低蔗糖濃度到20% 或是10% 20% 30% 梯度脫水 試看看 01/21 14:33
8F：→ nexusfantasy:厚度可以往下try 多看幾篇paper的厚度和圖當參考 01/21 14:38
9F：→ iiidns:蔗糖用什麼溶液配 01/21 16:01
10F：→ Kurihara:之前的人是配二次水 謝謝大家 我再試試看 01/24 20:39