作者Kurihara (不理不理)
看板Biotech
标题[求救] IHC 切片部份的问题
时间Thu Jan 20 00:50:45 2011
发问时请注意,若是要问实验相关的问题,请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
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我做的是果蝇脑的冷冻切片
参照PAPER上的作法 用福马林固定之後
蔗糖脱水之後去切片
做法是先将果蝇的嘴器拔掉 让福马林或是蔗糖从这里渗入
之前会先用福马林固定2个小时 再用蔗糖脱水不到24小时
结果切出来 被说脑脱水脱太多 萎缩了
後来只用福马林固定overnight 直接去切
果然如预期的脑切片一个洞一个洞
不知道大家有没有遇过类似的状况
麻烦大家给个建议吧 拜托拜托
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 114.26.164.28
※ 编辑: Kurihara 来自: 114.26.164.28 (01/20 00:55)
1F:推 aeroufo:如果切完再rehydride呢??应该可以吧因为不是上电显的片 01/20 12:34
2F:推 nexusfantasy:蔗糖的浓度是? 01/20 15:23
3F:推 Rodrigo:厚度?切下来马上贴玻片? 01/20 20:10
4F:→ Kurihara:感谢一楼 我去试试看 最後要看confocal 的 01/20 22:47
5F:→ Kurihara:蔗糖浓度是百分之三十 切完要到三抗再贴片 01/20 22:47
6F:→ Kurihara:厚度从20 到40 micrometer 都有试过 01/20 22:52
7F:推 nexusfantasy:降低蔗糖浓度到20% 或是10% 20% 30% 梯度脱水 试看看 01/21 14:33
8F:→ nexusfantasy:厚度可以往下try 多看几篇paper的厚度和图当参考 01/21 14:38
9F:→ iiidns:蔗糖用什麽溶液配 01/21 16:01
10F:→ Kurihara:之前的人是配二次水 谢谢大家 我再试试看 01/24 20:39