作者cobbco (草泥馬在心中奔馳)
看板Biotech
標題[求救] His tag 純化
時間Tue Jan 4 17:57:22 2011
以前利用細菌表現蛋白在用 His tag純化
都很OK~
最近 再利用cell line 大量表現蛋白後
再利用His tag純化
但出現的問題是 純化不到或是純化出來的量很少
請問有人有做過相關的實驗嗎？
也許利用cell line表現出來的量不足以 利用his tag 純化出來
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.120.213.170
1F：→ trumpet:沒有先測測titer，或是作作western，看是沒抓到還是沒表現 01/04 18:35
2F：→ cobbco:每次都有測試 確實有表現出目標蛋白 01/04 18:41
3F：推 ldy:用cell line表現的量一定很少阿 不可以跟E. coli比~ 01/04 19:09
4F：→ sardine:少是一定的 但完全看不出什麼耶 哪種蛋白&少是數值是多少? 01/04 21:36
5F：推 icome:正常 用mammalian cell收純化蛋白要養很大量很大量 01/04 22:10
6F：→ turtle24:cell表現量低很正常 01/04 22:31
7F：推 bider:是stable還是transient? stable的話量應該會比較少 01/04 22:32
8F：推 EsMirada:印象中His-Tag抗體普遍很爛 01/06 10:46
9F：推 HOPEFIRE:cell表現少很正常 01/06 21:52