作者cobbco (草泥马在心中奔驰)
看板Biotech
标题[求救] His tag 纯化
时间Tue Jan 4 17:57:22 2011
以前利用细菌表现蛋白在用 His tag纯化
都很OK~
最近 再利用cell line 大量表现蛋白後
再利用His tag纯化
但出现的问题是 纯化不到或是纯化出来的量很少
请问有人有做过相关的实验吗？
也许利用cell line表现出来的量不足以 利用his tag 纯化出来
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.120.213.170
1F：→ trumpet:没有先测测titer，或是作作western，看是没抓到还是没表现 01/04 18:35
2F：→ cobbco:每次都有测试 确实有表现出目标蛋白 01/04 18:41
3F：推 ldy:用cell line表现的量一定很少阿 不可以跟E. coli比~ 01/04 19:09
4F：→ sardine:少是一定的 但完全看不出什麽耶 哪种蛋白&少是数值是多少? 01/04 21:36
5F：推 icome:正常 用mammalian cell收纯化蛋白要养很大量很大量 01/04 22:10
6F：→ turtle24:cell表现量低很正常 01/04 22:31
7F：推 bider:是stable还是transient? stable的话量应该会比较少 01/04 22:32
8F：推 EsMirada:印象中His-Tag抗体普遍很烂 01/06 10:46
9F：推 HOPEFIRE:cell表现少很正常 01/06 21:52