作者boblu (六百)
看板Biotech
標題Re: [求救] 免疫螢光的步驟
時間Thu Dec 30 14:32:55 2010
※ 引述《Bluegnga (藍)》之銘言：
: 目前我在做血色素的螢光反應
: 我的一抗是rabbit 二抗是goat的
: 想請問大家一抗二抗的濃度大家一般都是怎麼配的呢?
這真的很難說
原則是看賣抗體的廠商給的區間
: 還有BSA做blocking,我看BSA溶液約在2-5%
: 不過我是買粉狀的BSA 想請問2-5%是怎樣的算法?
重量體積濃度
2g 溶於 100mL 就是 2%
: 另外我看在做抗體反應時 有些是寫放在室溫 有些則寫放在約37度
: 我想抗體是動物血清中萃取出的
: 是否放在溫度較近於體溫的溫度活性會比較高呢?
基本 沒錯
但是免疫染色大多時候追求的並不是抗體活性高而是專一性好
多少溫度 多少時間 真的也是 case by case
: 然後用PBS沖洗完應該要怎麼用乾呢?用氮氣吹還是用無塵紙吸乾呢?
免疫螢光沒有道理要 "用乾"
隨時注意用溼才對
: 還有曝光時間有比較推薦的嗎?
也是 case by case
（刪）
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◆ From: 97.92.0.42
1F：推 oplz:immunofluorescence 要怎麼在暗房用底片沾?? 12/30 15:15
我傻
前面才剛說螢光磷光要分清楚現在自己馬上昏頭 /囧\
※ 編輯: boblu 來自: 97.92.0.42 (12/30 15:36)